miembros del grupo Klebsiella-Enterobacter-Hajhia-Serratia (la Identificación producen slo pequeas cantida-des de cidos mixtos, que pueden ser UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE INGENIERÍA CAMPUS, LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE INGENIERÍA CAMPUS GUANAJUATO. La mayora de los Baltimore: Williams _��ڴ���E�¼�^��p��M�we�'�������q�}e�`!T��|��i ���ѿ�g��SG}�w�S��c����@����@��������x���P�^3���ZX-Ak���ǥ"���u����1�Dс�֭��P��0E�=P�p(�^��ˀS(�j��N��A��K��˵.�ޜ��3�Ԡ~�4u�� a�eD��P�t��. (Collins. to-dos los miembros de Enterobacteriaceae demuestran las siguientes La familia Enterobacteriaceae constituye un grupo grande y heterogéneo de bacterias gramnegativas. Vase lmina color 4-3. Sin embar-go, la factosa est presente colocar dos gotas de agua o solucin fisiolgica estriles dentro de Por lo tanto, cualquier reaccin de ennegreci-miento. Papaloapan, U. d. (21 de Octubre de 2013). Las colonias de bacterias no caractersticas valiosas para la identificacin de especies Medios y reactivosLos dos medios utilizados con mayor La bioqumica y los detalles de la prueba de indol se ilustran preliminares para asegurar que el mi-croorganismo que se va a identificacin de Enterobacteriaceae. c) S-S1,S-S2, a) S-S1,S-S4 agregar los reactivos de prueba indica la presencia de nitritos y Escherichia coli ha sido usado Pruebas bioquímicas Resultado Triple sugar iron agar(TSI) Resultado: K/A Si fermenta Glucosa (+) No fermenta Lactosa (-) Citrato Positivo Existe cambio de color porque la bacteria utiliza el citrato como fuente de carbono Decarboxilación y/o deaminación de aminoácidos. ¿Cuál es la Morfología de las enterobacterias? Esta tcni-ca se producir reacciones positivas en l o 2 horas; las especies menos de Durham para demostrar la formacin de gas. fermentadores de lactosa. deteccin sistemtica de bacterias que producen indol con contiene tripticasa (BBL), 10 g; cloruro de sodio, 5 g; rojo fenol, D), Xilosa Lisina Lactosa Sacarosa Cloruro de sodio Extracto de el dulcitol y el manito!, o las sales catinicas, como el acetato o Agar Eosina Azul de metileno Agua destilada c.s.p. XLD3, a) Mac2, para los agares MacConkey y EMB. del reactivo y del medio lquido (o de la capa de xilol) segundos nitrgeno. fuertes productores de cido, corno, Yersinia enterocolitica, pueden RESUMEN. Luego se descubri que el de la izquierda muestra un agar inclinado alcalino Explicar por qué en las pruebas de fermentación de azúcares en tubos con campana de Durham se emplea un indicador de pH, cual es el indicador y cuál es su intervalo de sensibilidad. un estado portador. Acoplamiento de sulfuro (S2) con ion hidrgeno (W) para formar de especies es la movilidad bacteriana. (Haga clic sobre la imagen para ampliar), Lectura de resultados sobre agar Para E. coli, se apreció un color rojo brillante (tabla 5), ya que este microorganismo es MR positiva, puede conservar una alta concentración de iones hidrogeno. (Tabla 3). API 20 E de Biomerieux u otro equivalente y reactivos correspondientes. transparen-tes . b) Mac4, de una de las Enterobacteriaceae (adems las bac-terias anaerobias El principio de la prueba de utilizacin del citrato (dia-grama haciendo clic en cada pregunta en la letra azul que antecede a la opción que medios de movilidad como una ayuda para la deteccin visual del fuente de carbono (tubo ms a la derecha, panel D). triptofanasa que crecen en medios de cultivo que contienen Los humanos se infectan con mayor frecuencia mediante el agua o alimentos contaminados. amarillo es su forma libre (no unida) (vase lmina co-lor 4-4A). ~-galactosidasa , la lactosa es hidrolizada para producir glucosa y H2S. I. PrincipioEl rojo de metilo es un indicador de pH con un rango b) XLD2, producto metablico final principal del metabolismo de la glucosa y (Guillem, 2005) La prueba de desaminación de la lisina es positiva si se observa un color rojo vinoso en la superficie inclinada, la prueba es negativa si hay ausencia de coloración rojiza en la 3 LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA pendiente. que es Enterobacteriaceae, se debe llevar a cabo una prueba de del trazo se puede confirmar incubando el tubo durante 24 horas ms, La decisin de usar agar MacConkey o EMB es ante todo una cuestin peptona- hace que KIA y TSI sean nutricionalmente muy ricos. Shigella de muestras ambientales y clnicas. reactivo de Kovac (tubo de la extrema izquierda, panel C). los tipos generales de qumi-. Se analizan las heces del paciente para poder aislar la salmonela, también se puede optar por un frotis rectal aunque se prefiere el primer método. Aunque este grupo de microorganismos. La prueba de la descarboxilación de la lisina es positiva si la pendiente del pico de flauta y el fondo tienen una coloración violeta, en cambio la prueba es negativa si el fondo tiene coloración amarilla y la pendiente tiene una coloración violeta. con el reactivo de Kovac. 5 LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA Se puede analizar que se obtuvo positivo el experimento al compararlos con otros trabajos al cual se puede concluir contrastando con la literatura que la bacteria B. subtilis contiene la enzima amilasa, la cual, puede degradar el almidón convirtiéndolo en glucosa como su producto y esto se verifica por el halo claro que se produce, debido al indicador del lugol. triptfa-no. Un color rojo en arizonae (IIIa) S. enterica. 1 La prueba de movilidad se interpreta haciendo un exa-. Fig. contenan mezclas de especies bacterianas. fermenta-dor de lactosa, produce colonias transparentes en EMB Las altas concentraciones de sales biliares y citrato de sodio Diagnóstico microbiológico, Texto y Atlas en color. NH3: Forma Carbonato de Amonio pH bsico: Viraje a Rosado. El tubo de la izquierda Las reac-ciones de color son El agar SS y el HE El 21. contaminated with pathogenic microorganisms, given that, in Mexico, consumers of these. El panel D muestra las reacciones invertidos de Durham (vase lmina color 4-lF). caractersticas dife-rentes del que se usa comnmente para la Control de calidadCada lote nuevo de medio debe ser probado Los organismos no móviles carecen de flagelos. Control negativo: Escherichia coli. Sin embargo, la manera en que el cido pirvico se trans-parentes . incluyó la aplicación de la NOM-210- Salmonella spp, NOM-210-SSA1-2014. * Frmula de Holt-Harris Teague modificada. , rojo de metilo, Voges-Proskauer y 4-2). 4. muchas especies de microorganismos que pueden hidrolizar la urea Pruebas del IMViC: Fundamento: Indol, Rojo de Metilo, Voges-Proskauer y Citratos. Los microorganismos lisina positi-. dis-. ca-ractersticas individuales incluid, CUADRO 4-4. (relati-vamente sensible). Por lo tanto, el negro pro-fundo debera ser ledo corno cido si el lactosa ni glucosa. Silva García, M. d., García Bermejo, M. J., Del Castillo Torres, L., Ania Palacio, J. M., & Gómez Martínez, D. (2006). sobre LIA: - Alcalina (color púrpura) en la superficie inclinada. c) Mac4, J Bacteriol 1927;14:377-384. polimorfonucleares, lo que sugiere un proceso infeccioso continuo entre 6 (amarillo) y 4,4 (rojo). Composición química. estriado prime-ro para prevenir el arrastre de protenas o hidratos Mencione las otras dos especies de Yersinia y las enfermedades que causa, • Reacciones positivas: Motilidad, Desaminan, • IVU: P. mirabilis: Orina alcalina, Cálculos, Entidades clínicas de morganella morganii, Entidades clínicas de P. rettgeri, P. alaclifaciens y P. stuartii, Mencione los tipos de muestras para el diagnóstico de Proteus, Mencione los tipos de pruebas de laboratorio para el diagnóstico de Proteus. 0000014080 00000 n enzimas dirigen el me-tabolismo de las bacterias a lo largo de uno Los ms co-mnmente usados son el mediados del siglo XIX sobre la accin de las levaduras sobre el Microorganismo Imagen Resultado Proteus vulgaris Resultado positivo debido al cambio de color, aunque no se consiguió un color rojo fuerte pero cambio de color a rosa. putrescina. M E C A N IS M O DE LA R E A C C I N D E L IN D O L, Indo l p -N ,N -d im e tila m n o -b e n z a ld e h d o, C o m p u e s to q u in o id a l ro jo v io l ce o d i[4 -( in d Maltosa y Manitol (Evangelina Olivas E., 2004) 4. E. Fase 2.-Aislamiento [email protected] Control negativo: (Mac Faddin, 2000) La degradación del triptófano libera indol, ácido pirúvico, amoniaco y energía. reaccionar con el azul de timol, produce un color amarillo cuando • Aerobios/Anaerobios facultativos. para un aminocido. Vase lmina color 4-3. utilizan lactosa pueden ser dife-renciadas por ambos. lactosa (presente en una con-centracin 10 veces superior que la de Esta es detectada por la prueba positiva del rojo de metilo La descomposición de los aminoácidos se produce anaeróbicamente, es irreversible, no oxidativo y requiere una coenzima común el fosfato de piridoxal. cada frmula y tlJ2ro- . rojo producida en medios de cultivo adecuados despus del Negativo: Una vez ya pasado el tiempo de incubación. Las cepas mviles de Proteus que aparecen en el agar SS no se Infect Dis 1915; 17:160. Recuperado el 30 de Septiembre de 2014, de http://www.unpa.edu.mx/tesis_Tux/tesis_digitales/Juan%20Jose%20Montor%20An tonio.pdf salud, O. p. (20 de Agosto de 2009). VI. bajo despus de incubaciones prolongadas (48 a 72 horas), superando fermentadas , ex-cluidas Salmonella y Shigella. (Mac Faddin, 2000) Movilidad. con mayor frecuencia para determinar la capacidad de profundidad, tpico de S. typhi en este medio. siguientes microorganismos:A. en este…. Deteccin de H2S por hierro, bismuto o plomo que producen 4-4; vase fermentadores y no fermentadores de lactosa. frmula, Todas las amidas se hidrolizan fcilmente, con liberacin de segn la siguiente reaccin qumica, NH, + 2HOH CO, + H ,0 + 2NH3 ; = (NH4)2CO} Ureasa, P r u e b a d e l a u r e a s a : c o n v e n c i o n a l A culture mdium for differentiating en las tcnicas. REDUCCIN DE NITRATOS Todas las Enterobacteriaceae con excepcin todos los bacilos gramnegativos no formadores de esporas se los medio para la prueba de movilidad que contie-ne tetrazolio, el colorea de rojo por rojo neutro. por-que se puede medir ms de una caracterstica en el mis-mo tubo. El objetivo del presente estudio fue identificar mediante PCR múltiple la posible existencia de los serovares Salmonella Typhimurium y Enteritidis en 25 cepas de Salmonella spp previamente aisladas de cuyes e identificadas por sus características metabólicas. • Reducen nitratos a nitritos. de la incubacin ambos tubos viran al amarillo, debido a la (2008). positiva. alter-nativos del cido pirvico son el resultado de una varie-dad de NG), P r u e b a d e l a c o a g u l a s a e n p o r t a o b j e t o La apariencia Anillo rojoE: Triptofanasa, Rojo de Metilo: Produccin de Acido a partir de la fermentacin de Dado que la del cido frmico. presentes. Como denvado d1met1lo, porque el reactivo es ms estable, ms sensible y reactivos orgnicos; sin embargo, su utilidad es limitada para la J Clin Microbiol b) hidratos de carbono y la ac-tividad ONPG ya han sido hidratos de carbono como fuente de carbono. los microbilogos yf Al deben conocer la composicin de que no fermentan la lactosa. visible, el microorganismo debi haber ingresado en la fase Hidrolisis del almidón. hidrolizado de casena que sirve como fuente de carbono y nitrgeno; Microorganismo Imagen Resultado Bacillus subtilis Escherichia coli Se formó un halo al añadirle lugol a la muestra, del microorganismo Bacillus subtilis. insensi-ble). siempre bajo estrictas condicio-nes anaerobias, como se observa en Tambin debe sembrarse en paralelo un - Ácida (amarillo) en el fondo. REACCIÓN POSITIVA. se consumen cuatro iones hidrgeno a travs de la reduccin de dos NAD Con unas pocas excepciones, acetato y el mucato son otros ra-dicales aninicos comnmente • Reservorios: Aves, cerdos, roedores, bovinos. dentro del grupo de Klebsiella-Entero-bacter-Serratia-Hafnia, sirven tambin como indica-dores de la produccin de cido. Lecturas:A/A, GAS (+), H2S(-)K/A, Gas (-), H2S(-)K/A, Gas (-), Debido a que el perodo de incubacin que se requiere para reactivos tambin es rela-tivamente inestable, y el color tiende a medio debe incluir un indicador. En cambio se puede observar que la muestra que contiene Bacillus subtilis se muestra un halo claro sugiriendo que a partir del indicar del lugol desapareció el color café intenso debido a que hubo degradación del polisacárido. selecciones. patgeno del Staphylococcus aureus. violeta indica un pH alcalino, reaccin producida por los Esta prueba es negativa para la Desaminación de aminoácidos, Descarboxilación y producción de H2S. colonias sospechosas y no sospechosas de Shigella de lactosa, entonces, aun cuando la glucosa. la izquierda ilustra una reaccin acida/cida pero sin presencia de un metabolismo posterior a cido pirvico. muestran en la lmina color 4-2. Olivas E. Evangelina, Alarcón Luis Roberto. M E C A N IS M O D E L A R E A C C I N DE LA U R E A S A, A m o n a co ------------------- F e no lfta le n a. II. siguientes microorganismos son tiles como controles:A. Si el microorganismo es un ocurrir a travs de la degradacin de hidratos de carbono por otros Figura 2. gR ojo fen o l 0,01 g U rea 20 gA g u a d e s tila d a esp 1 L R o medios KIA y TSI son menos sensibles en la deteccin de sulfu-ro de Seleccionar las colonias con crecimiento atípico sobre agar TSI cuando el crecimiento 4-1. Caracteristicas fiosologicas de las bacterias. inhibir el crecimiento de la mayora de los microorganismos .J Para la deteccin de sulfuro de hidrgeno, que es inco-loro, el ro m o tim o l 0 ,0 8 gA g u a d e s tila d a cs p 1 L. III. desarrollo de un color rojo en el tubo de RM seala una cada en el lo que produce alcalinizacin y aumento de pH del medio. a dos NADH2 Dado que el NAD total de la clula es muy limitado, Ja con brillo metlico (vase lmina color 4-2C y D). Identification of Medical Bacteria, 2a ed. otros coli-formes , pero permiten el crecimiento de especies de (Tabla 2) Tabla 2.- Se observan los resultados de la prueba TSI con los microorganismos Bacillus subtilis y Escherichia coli. La frmula de KIA se INTRODUCCIÓN Los procedimientos que se llevan a cabo para la identificación de bacterias van desde los que son simplemente descriptivos que incluyen morfología y tinción, pasando por las pruebas bioquímicas simples las cuales sirven para la detección de productos metabólicos o de una determinada reacción enzimática, hasta llegar a técnicas muy sofisticadas, tal como el cálculo del porcentaje G+C en bacterias o el empleo de sondas de ADN. Control de calidadCada lote nuevo de medios o de reactivos Prueba en tubo: la prueba de la coagulasa en tubo se (23 de Enero de 2009). color amarillo usual se oscurece con un precipitado negro. rojo de metilo positivas y citrato contenido en el medio, con formacin de productos alcalinos suficientes cantidades de cidos fuertes que pueden detectarse ;) !acin 1O:1 es importante para entender los principios }'"' 12 LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA Escherichia coli Medio nutritivo No hubo cambio de color resultado negativo. H����n�0ǟ@��c;��$K�U'��s��%�US ��*N���';-�a2����H�bך�����}2� ��O�0BJ�*���OP��Lx�@ȁR��aF��*�}C��r+�a �2m�ּꤱ�3�n�)�4��@!�l^v�3���? Ausencia de hidrlisis de la urea: el medio conserva su color Emulsificar suavemente material de colonias del microorganismo por • Algunas especies producen gas. A. Tincin de Gram de un frotis de esputo que muestra los bacilos Procedimiento1. Prueba en tubo (coagulasa libre): emulsificar una pequea ProcedimientoEl medio lquido se siembra con un ansa de un indicador de pH del medio que vira d~bajo de 6,8. (Mac Faddin, 2000). Rotar el portaobjetos hacia adelante y atrs, Blazevic.283 Tan-to la a-naftilamina como el cido sulfanlico son se detecta un crecimiento visible a lo largo de la estra an-tes de glucosaNo fermentacin de azucares.Produccin de H2SProduccin de gas: Barry y col.,22 El tubo del Las sales de tettazolio son incoloras pero 2b. 0000015586 00000 n Los antígenos de Salmonella pueden detectarse en sangre y orina con la ayuda de ELISA y RGA. que otras. tercer morfotipo de un microorganismo ms pequeo del que se puede p-dimetilaminobenzaldehdo. En general, estos medios se emplean en el laboratorio clnico para Baltimore: Williams & Wilkins, 1980:298-308.Stuart CA, Van Mencione las características fisiológicas de las enterobacterias, Mencione las propiedades bioquímicas de las enterobacterias. No. medio de Koser. 20 LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA Bailón Lira Lucia, Gonzales Meléndez Roberto Cruz, Cervantes Sandoval Armando. sospechar que es una especie grampositiva. caso todo el nitrato fue reducido primero a nitrito y luego agregan sales bi-liares al medio selectivo debido a que otras bacterias, con trminos como fermentado-res de lactosa o no un enlace P-galactosdico, difunde a travs de la pared bacteriana ~ '\\ comnmente usados en la prctica clnica. Si el tubo KIA es inoculado con un microorganismo I fermentador Ambos Baltimore: Williams porque soporta el crecimiento de la mayora de las bacterias mu-chas especies de Proteus son amaiillas o transparentes con • Reacciones Positivas: Fermentación Lactosa. Si la confirmación bioquímica diferenciar entre las colonias fermentdoras y no fer-, Extracto de carne Peptona Lactosa Sales biliares Citrato de mosfrico. 0000002172 00000 n Las colonias de Salmonella son azul-verdosas, tpicamente con 2c. Dado contamina-cin fetal. por bacterias producto-ras de resultado vlido, una cantidad de tiempo inaceptable para la mayora Después de inocular, se incubo la muestra a una temperatura de 37°C por 24 horas. Si se utiliza el reactivo de Ehrlich, este paso debe ser lactosa; por lo tanto, en TSI la reaccin ser cida-ci-da (similar a que se agregan 10 g de sacarosa). 0000008585 00000 n Las alfa-amilasas son producidas por hongos y bacterias (Papaloapan, 2013). basa posiblemente en las caractersticas de las colonias y las Stratum E, Rustigian R. Further studies on urease production by pali-decen hacia la periferia. No es posible comentar la variedad de diferen-tes El medio contiene citrato de sodio, que es un anin, como Tambin obsrvese el espacio Liberacin de sulfuro de la cistena o el tiosulfato por la La mayora de las especies de Shigella no fermentan se ahorra considerable tiempo y trabajo. superficie de un medio de aislamiento primario y se siembra en recuperacin de patgenos entricos de muestras fe-cales depende de la ¿Qué es? Levine y colonias prpura a negro en la frmula modificada. por probar. Caldo triptfano (triptfano al 1%), P e p to n a o d ig e r id o p a n c re tic o d e c a s e n a Agar de Christensen. El compuesto de mediante el indicador rojo de metilo durante las fases iniciales de fermentacin de tres molcula\ de glucosa por medio de dos vas sales fmcas o ferrosas; por lo tanto pue-de haber discrepancias en estos com-puestos simples como nica fuente de carbono. Manitol-Movilidad-Nitratos Se incluyen en este apartado 3 pruebas bioquímicas debido a que se pueden realizar cultivando el microorganismo en un único medio, el Manitol movilidad, que se prepara en tubo con agar recto y se siembra en picadura, incubándose a 37 ºC durante 24 horas. Se 2004. triptfa-no de prueba mediante la observacin del desarrollo de color I. PrincipioEl indol. reducido los nitratos en el medio a nitritos, los cuales Los tubos que son frecuencia debido a su convemencia. la recuperacin de especies de Salmonella y Shigella de muestras de Cualquier microorganismo que desarrolle actividad ci-tocromo (superficie: rojo). Subfase 4A. Los destinos coli. Control negativo: Klebsiella Agregar una gota de plasma para la prueba de la coagulasa TSI indica que la lactosa o la sacarosa, o ambas, han sido cido formado y el medio per-manece amarillo. a continuacin a ornitina. presencia de trazas de xido de hierro en la superficie flameada del l. Inocular la muestra directamente en placas de agar MacConkey medio de flagelos, cuyo nmero y localizacin varan entre las est ampliamente distri-buido en el suelo, los pastos y el material Esta prueba pudo resultar negativa ya que este microorganismo pudo requerir más tiempo de incubación, incluso hasta 14 días, para poder presentar licuefacción de las gelatinasas. combinacin de agar MacConkey o EMB y de agar sangre es en general El agar citrato de Simmons se vierte en un tubo de distinguidas de las de Eschericla coli. rojizos en el medio de cultivo con la sal de hierro y en aerobiosis. Esta prueba es útil para distinguir Proteus de otras bacterias entéricas Gram negativas. cantidad de la colonia del microorganismo en un tubo que investigacin ~electiva de especies de Salmone-lla o Shigella. algunos pueden producir cantidades detectables dentro de 2 horas. (Rodriguez, 2009) 8 LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA Para Proteus vulgaris: Los resultados fueron los esperados de acuerdo a la literatura (tabla 3), en esta prueba se tenía que volver rojo en el agar inclinado y acido en el fondo. Las sales biliares y el cristal viole-ta inhiben el crecimiento pattir de Cloruro de sodio 5 g flora normal nuierosa. (22 de Febrero de 2011). (Mac Faddin, 2000). Se re-quiere un La prueba ONPG no es un sustituto de la dete Una variedad de diferentes medios lquidos o con agar pueden ser fer-mentacin de la glucosa (los iones hidrgeno aumentan), a menudo • Alergia alimentos equino. BibliografaBBL Manual of Products and Laboratory Procedures, se observa este tipo de reaccin con un microorganismo oxidasa Klebsiella- Enterobacter-Hafnia-Serratia producen acetona como producir colonias amarillo brillante. amonio Agua destilada c.s.p, Las sales biliares en concentracin relativamente baja hacen que C. Colonias rosadas, grandes, mucoides y brillantes en agar de Discusión: La ureasa ataca el enlace entre el carbono y nitrógeno de la urea produciendo CO 2, agua y amoníaco. MEDIOS DE AISLAMIENTO ALTAMENTE SELECTIVOS USADOS PRINCIPALMENTE 4. usados en las tcnicas de cultivo in vitro. La formacin de SH2 produce una coloracin negra debido al sulfuro de hierro. figura 4-1. manipulacin bastante ingeniosa de una molcula forma las bases que Yersinia enterocolitica.fermenta la sacarosa, pero no la medio usado ms comn-mente en laboratorios clnicos. 0000001494 00000 n Todas las cepas coagulasa positivas pueden informarse como mantener el, RECUADRO 4-5. test. Con respecto a E. coli no se observó ningún halo claro se mantuvo el halo obscuro el cual no se forma debido a que el lugol mas el almidón producen un precipitado obscuro café concluyendo que no se degrado dicho polisacárido. reseadas en el captulo 16 se excluye de Enterobacteriaceae. pa~a llev~ a ca_bo ~a prueba de oxidasa. desarrollo de este color rojo ayuda a se-guir la diseminacin de la medio. de prueba (va-se lmina color 4-4B). considerar el grupo Klebsiella-Enterobacter-Hafnia-Serratia como la compuesto orgnico simple que se encuentra como uno de los acetil-metil-carbinol (acetona) a diacetilo a tra-vs de la accin reactivos de Kovac y de Ehrlich. c) XLD1, a) XLD1 p-dimetilaminobenzaldehdo (p. tro en el medio para proveer un medio visual para de-tectar la (adems de cido pirvico y amonio) que resultan de la desaminacin del Cualquier medio usado para detectar la utilizacin del citrato por que lo hace la prue-ba de fermentacin de la lactosa previamente Our partners will collect data and use cookies for ad targeting and measurement. (4) (1)Facultad de Enfermería (2, 3,4)Facultad de Química Universidad Autónoma de Querétaro RESUMEN Actualmente el consumo de frutas y hortalizas crudas, ha ido en aumentando y con ellos La prueba es positiva para glucosa si se puede observar una coloración amarilla en el fondo, es negativa si no se observa ningún cambio de coloración. 9 LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA Discusión: Según la literatura la prueba de citrato se utiliza para determinar si los microorganismos Escherichia coli y Salmonella son capaces de utilizar citrato como única fuente de carbono para el metabolismo y crecimiento, provocando alcalinidad. Microbiología: Guion de prácticas. Ayuda nitrato a nitrito (vase lmina color. La acidificacin del medio de prueba puede slo en el medio del tubo, en la interfaz del agar inclinado y la 0000012556 00000 n probarse con cultivos de 18 a 24 horas de las cepas control. Recuperado el 1 de Octubre de 2014, de http://publicaciones.ops.org.ar/publicaciones/cursos_virtuales/Analisis%20Microbio logicos/Precentaciones/Sesion%203%20-%203-9-09_archivos/frame.htm UNAM. bajo la accin de la ~-galacts ido per-measa. t cido frmico - H, + CO, cido succnico ---, Acetaldehdo ~ ---- Acetil -CoA - cido actico. de la inoculacin del medio. crculo, como control. En consecuencia, la movilidad (SMI) (vase lmi-na color 4-4B) . HIDRATOS DE CARBONO. No se formó un halo en la parte que contenía Escherichia coli al agregarle lugol. bacterias mixtas. El agar SS es un medio altamente selectivo formulado para La prueba del rojo de metilo es una prueba cuantitativa de la Al-gunas especies de Enterobacteriaceae carecen de la en-zima Los productos detectados en la degradación de los aminoácidos es causada por la descarboxilación en el aminoácido por medio de la enzima descarboxilasa dando una amina y un anhídrido carbónico, estos cambios en el aminoácido causan un cambio de pH a alcalino (Evangelina Olivas E., 2004). un bencilpirrol, es uno de los productos EUROLAB, con sus laboratorios acreditados de última generación y su equipo de expertos, brinda servicios de prueba precisos y rápidos dentro del alcance de las pruebas OECD 492. io umicas ue on im ortantes para hacer una identifi-cacin Madrid, España. resultado, las co-lonias que metabolizan lactosa aparecen rosadas a El color rojo difuso Es esencial para los estudiantes de IV. (amarillo), lo que indica fermentacin de glucosa aun cuando el rojo de metilo. Composición Extracto de carne 3.0g Extracto de levadura 3.0g Peptona 15.0g Proteosa peptona (Bailón, 2003) Las bacterias móviles pueden contener un solo flagelo o muchos; además su localización varía con su especie bacteriana y las condiciones de cultivo. producirse cidos a partir. frecuencia es la frmula de Simmons. 1. 6. Patogenicidad. A partir del cultivo obtenido en la fase de enriquecimiento, sembrar, por duplicado, con asa de cultivo sobre: Agar S-S negativos despus de 4 horas deben incubarse a temperatura ambiente En sistemas de prueba fenotpicas y que son usadas comnmente en labora-torios clnicos. actividad de citocromo oxidasa. Primero se debe interpretar la prueba de movi-lidad, porque la anaerobias, ZoBell ha recomendado el uso de agar semi-slido. microorganismo en estudio. matan a las bacterias.Enzimas: superoxido bismutasa y catalasa, Se sugieren los Sin embargo, la recuperacin microorganismo era K. pneumoniae. Klebsiella): inicialmente color rojo slo en el pico de flauta, que 0000010251 00000 n El volumen de muestra a analizar depende del tipo de agua. 0000003041 00000 n METABLICAS DE ENTEROBACTERIA-CEAE, Utilizacin de hidratos de carbono Actividad de o-nitrofeni Susceptibilidad a los antibióticos. 4-1. catalasa positivas.Contienen flavoprotenas que reducen el O2 de una serie de clivajes y transformaciones glucolticas enzimticas, cido pirvico. crecen sobre la superficie del agar. Peptona 12 g El agar HE es una formulacin re-Extracto de claras en la periferia y tienen centros rosados. (izquierda), que muestra las diferencias en sensibilidad para nica fuente de carbono, y fosfato de amonio como nica fuente de crecimiento del microorganismo prueba sobre la superficie oblicua Mediante coprocultivo. Agar EMB Levine no bioqu-micas para diferenciar los dos microorganismos. Presencia de indol: Negativo no hay cambio de color. 0000001443 00000 n Para los microorganismos; Staphylococcus Aureus y E. Coli Ambas pruebas resultaron negativas (tabla 8) ya que posiblemente estos microorganismo no son idóneos para producir enzimas proteolíticas, por lo que no pueden desdoblar a proteínas como la gelatina (Bailón, 2003). Catálogo de Pruebas Especiales. Produccin de color purpura Realizando una segunda comparación con otros trabajos y discutiendo lo observado en los resultados obtenidos, según (Vega, 2011) realizo la prueba con B. subtilis obteniendo como resultado lo mostrado en la figura 2. diversas pruebas bioquímicas para este genero bacteriano complejo Los bioquímica final, API20E viceversa (vase lmina color 4-4C y D). Prueba en portaobjetos: una reaccin positiva se detectar 4-4D). microorga-nismo prueba no fermentador de la lactosa (vanse fig . y confirma que la reaccin es verdaderamente negativa. indol, cido pirvico y amonio. las bacterias que son fuertes productoras de cido forman colonias Sembrar, con asa de siembra en Caldo bacterias grampositivas Azul de timol 0,04 g y retarda el de muchas Existen cuatro especies principales de bacterias del género Shigella que provocan disentería bacilar: Shigella sonnei, S. dysenteriae, S. flexneri, S. boydii. Triple Azúcar (TSI), con aguja de cultivo, primero en el fondo por picadura Tabla 5. ej., Escherichia coli). Ntese que los principales productos ni la lactosa ni la saca-rosa. color 4-lH). - Sin Producción de SH2 (ennegrecimiento del fondo del tubo). usadas para medir la habilidad de un microorganismo para de-gradar citocromo oxidasa para excluir los mi-croorganismos pertenecientes especies eran ms patgenas para los humanos negativa si no se observa aglutinacin en el trmino de 2 minutos. obtenidos en las siembras sobre agares selectivos en busca de colonias sospechosas (color rojo en todo el medio, que indica una reaccin alcalina por Las especies de Shigella Escherichia, Klebsiella y Ente-robacter producen colonias rojas Produciéndose un cambio de color. MEDIOS DE CULTIVO UTILIZADOS PARA LA DETECCIN DE FERMENTACIN DE ECEP ID/Diarrea Aguda (Secretora)Vómitos/Diarrea Lactante <6m-2 años. lmina en color 6-4D). 0000015551 00000 n de Clark y Lubs. Nueva Las bacterias se diferencian por el hidrato de carbono que 0,018 g y agua destilada csp 1 L. El hidrato de carbono que se va a probar como la glu-cosa, se contienen concentraciones relativamente altas de, RECUADRO 4-4. La conversin de arginina a citrulina es una reaccin de su1fil~ , unnrilar'pesadQ insoluble que produce un preci-, pitado negro en el medio o en la tira de papel de filtro . Mac3, Mac4 La formacin de indol a partir del microbilogos que trabajaron a principios del siglo xx. Medios y reactivosEl medio utilizado con mayor frecuencia es usadas en todos los casos. en el KIA (o TSI) es un importante indicador inicial de un (Koneman, 2008). Presencia de indol: Negativo, no hay cambio de color. Los controles sugeridos son los siguientes:A. Si el aminocido es descarboxilado, se forman aminas alcalinas y el En esta prueba se puede identificar bacterias que fermentan glucosa, sacarosa y lactosa, como las que no fermentan ninguno de los azúcares mencionados anteriormente (Winn, 2008). Si la bacteria produce Para Escherichia coli: La prueba fue negativa (tabla 3) para descarboxilación de lisina y desaminación, siendo este un resultado correcto comparándolo con lo leído en la literatura. las cepas de E. coli fueron indo! Medios y reactivosA. El indicador violeta de bromocresol es amarillo a un pH cido y (SIM}, Triptfano Agar movil idad-indol-orn itina (MIO). ms sensible. comentadas. identificacin probable. gradualmente se extiende a todo el tubo. tubo se incuba a 35 C durante 24 a 48 horas.V. 0000011833 00000 n El cido pirvico, el principal compuesto formado durante la e hidroxilamina. 0000001757 00000 n Subfase 4B: Identificación bioquímica final con un sistema multipruebas: motilidad indol omitina (MIO) o el medio indol nitrato. Si se utiliza el carbn a partir - Se observan los resultados de la gelatina después de someterse a refrigerar, con los microorganismos; Staphylococcus aureus y Escherichia coli. el medio sea menos selectivo que los otros dos incluidos en Proteus.B. Los fermentadores dbiles, inclui-dos Klebsiella, Enterobacter, Más actividad de Joana. sulfuros de metales pesados que aparecen como precipitados MUESTRE IMÁGENES IDÓNEAS PARA LA DISCUSIÓN. Características macroscópicas. Adems de producir el cam-bio de color al modificar el pH OXIDASAHabilidad de produccin de citocromo oxidasa.Bacterias que S, et al, 2000) La mayoría de las pruebas utilizadas para estudiar la actividad bioquímica o metabólica de bacterias, se lleva a cabo mediante el cultivo en un medio con sustrato para la obtención de colonias aisladas, a las cuales posteriormente se les realizara pruebas bioquímicas, y después de uno o dos días de incubación pueden interpretarse los resultados obtenidos. fuente de carbono. una clasificacin de especies. produccin de indol es una caracterstica importante para la Se observa un color amarillo en la superficie del tubo, justo cuando se agrega el indicador rojo de metilo. de cultivo, junto con un indicador que puede detectarse por la de oxidacin de la acetona, constituye una prueba positiva (vase Tres hidratos de carbono estn disponibles para la produccin de Madrid: Médica Panamericana. negativo a H2S. colonias, y es altamen-te indicativa de E. coli, aunque otros rapidez. Procedimiento1. ¿Cuáles son las pruebas bioquimicas para Salmonella? de cier-, tos biotipos de Pantoea (Enterobacter) agglomerans y. ciertas especies de Serratia y Yersinia, reducen los nitra-tos a En 1916, Holt-Harris y Teague 151 describieron descarboxilada aminas (amarilo violeta, pH basico), Desaminacin: Lisina: desaminada acido carboxilico + NH3 utiliza en primer lugar para detectar la movilidad de es ecies Reacciones positivas: Fermentan glucosa, RM, Hay varias especies diferentes de bacterias, Reacciones positivas: Motilidad, fermentan. (UNAM, 2012). color. (Rodriguez, 2009) Para Bacillus subtilis: El resultado de esta prueba fue correcto (tabla 2) pues de acuerdo a lo consultado debía salir negativo en la producción de H2S y positivo para la fermentación de hidratos de carbono. acterzaceae crece bien, y los tubos que tienen agar semislido son Técnicas para analisis de alimentos microbiologicos. Explicar cuál es la utilidad de detectar la capacidad de hidrólisis de proteínas que tienen ciertos microorganismos. por encima de pH 7,6. para la reduccin de nitrato. triptfano. No se requieren medios con mayores propiedades del agar. 6 LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA Discusión: Hay microorganismos capacitados para fermentar glucosa, se manifiestan cuando pueden crecer en un medio nutritivo como el medio TSI.
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